Für die Explantation müssen Pflanzengewebe in Primärstruktur verwendet werden, für deren Reproduktion ist es wichtig, dass es sich um junges Gewebe und eventuell mit einem Hauch von meristematischem Gewebe handelt, dh dass diese explantierten Gewebe vital sind.
Bei bestimmten Arten gibt es biotechnologische Präferenzen bei der Auswahl des am besten geeigneten Explantats für die Genese der Pflanze in vitro, zum Beispiel wird die Pfahlwurzel (Wurzel) für den biotechnologischen Anbau von Karotten verwendet.
Auch die Art des verwendeten Explantats beeinflusst das mehr oder weniger verkümmerte Wachstum des Kallus; eine begründete Wahl des Explantattyps ermöglicht daher eine effektivere biotechnologische Kultur.
Schaffung eines geschlossenen Systems, das das konditionierte Wachstum der Kultur in vitro ermöglicht.
Die Zellen des Explantats haben eine spezifische Gewebecharakterisierung, daher müssen sie konditioniert werden, um diese Differenzierung zu verlieren und sich undifferenziert zu teilen, daher ist es wichtig, ein geeignetes Kulturmedium zu verwenden. Das Kulturmedium ist im Grunde eine Brühe, die reich an Nährstoffen wie Saccharose, einfachen und komplexen Salzen ist. Das Kulturmedium muss den Energieaufwand der undifferenzierten Zellen auf den sekundären Stoffwechselweg lenken; Dazu wird das System im Labor im Dunkeln platziert, um zu verhindern, dass die Pflanzenzelle ihre Energiereserven für die Photosynthese verbraucht; findet eine Photosynthese statt, reicht diese oft nicht aus, um den Energiebedarf der In-vitro-Kultur zu decken.
Unter den Bestandteilen des Bodens finden wir Indolessigsäure, eines der Pflanzenhormone, die für die spezifische morphologische und physiologische Entwicklung einer Zelle verantwortlich sind und deren geringe Konzentrationen große Veränderungen im Stoffwechsel und der Morphogenese einer Zelle oder eines Pflanzengewebes bestimmen. Das Vorhandensein von Pflanzenhormonen in der Kulturbrühe spielt eine grundlegende Rolle beim Verlust der Gewebecharakterisierung der Explantatzellen, um totipotente Zellen zu erzeugen, die dem produktivsten Stoffwechsel zugeführt werden können.Die Bestandteile des Kulturmediums sind die Werkzeuge dass der Technologe variieren kann, um ein bestimmtes biotechnologisches Produkt zu erhalten.
Ein weiteres Merkmal des Kulturmediums ist der saure pH-Wert.
Grundlage dieses Zweiges der Biotechnologie ist die Pflanzenphysiologie, also die Lehre von der Funktionsweise einer Pflanzenzelle, die, wenn bekannt, dem Biotechnologen grundlegende Erkenntnisse über die am Zellstoffwechsel beteiligten Nährstoffe vermittelt die zelle, der boden ist das ergebnis vieler erfahrungen und versuche auf qualitativer grundlage. experimentelle nachweise haben die realen und wesentlichen bedürfnisse von pflanzenzellen in vitro bestätigt, aber zum quantitativen kommt noch das qualitative problem hinzu: die konzentrationen der substanzen verwendet werden, sind in der Tat genauso wichtig für ein richtiges Wachstum.
Für unterschiedliche Arten können die gleichen Nährstoffe verwendet werden, jedoch in unterschiedlichen Konzentrationen oder unterschiedlichen Bestandteilen. Es ist auch möglich, dass In-vitro-Kulturen von Explantaten, die aus derselben Pflanze stammen, unterschiedliche funktionelle und biotechnologische Eigenschaften aufweisen; je nach Art des verwendeten Explantats ändern sich auch die erhältlichen Metaboliten in Abhängigkeit von der unterschiedlichen Handhabung des Kulturmediums. Es ist jedoch klar, dass es zur optimalen Bewirtschaftung einer Kultur notwendig ist, die Stoffwechselwege der Pflanzenzelle des Explantats genau zu kennen, um diese mittels Eine undifferenzierte Zelle in vitro kann sich auch metabolisch anders ausdrücken, als sie sich in einem natürlich gewachsenen Gewebe ausdrücken würde.
Es gibt vorverpackte Kulturmedien, um die ersten Schritte der In-vitro-Kulturpassage zu erleichtern; Diese Böden können je nach Art des Explantats, der Art und dem gewünschten Ergebnis modifiziert werden. Damit der Kallus aus biotechnologischer Sicht ein produktives Element wird, ist es notwendig, einen Teil des Zellmaterials in ein gerührtes flüssiges Medium zu überführen. An dieser Stelle ist zu evaluieren, wie dem Zweck entsprechend vorgegangen werden soll: agronomische Verbesserung, Biotransformation, Biomasse oder Produktion von Wirkstoffen.
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